实验三  食品中粗脂肪的定量测定

一、目的与要求：

1.学习索氏抽提法测定脂肪的原理与方法；

2.掌握索氏抽提法基本操作要点及影响因素。

二、实验方法：

1.原理：

本法为重量法，用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量，该法适用于固体和液体样品。根据脂肪能溶于乙醚等有机溶剂的特性，将样品置于连续抽提器—索氏提取器中，用乙醚反复萃取，提取样品中的脂肪后，回收溶剂所得的残留物，即为脂肪或称粗脂肪。因为提取物中除脂肪外，还含有色素、蜡、树脂、游离脂肪酸等物质。

2、试剂：

①无水乙醚或石油醚（沸程 30～60℃）；

②滤纸筒

③脱脂棉花

3、实验仪器：

索氏抽提器、恒温水浴锅、电热鼓风干燥箱，干燥器，分析天平:感量0.001g和 0.0001g

4、操作方法：

①、滤纸筒的制备：将滤纸剪成长方形 8×375px ，卷成圆筒，直径为 150px，将圆筒底部封好，最好放一些脱脂棉，避免向外漏样。

②索式抽提器的准备：索氏抽提器由三部分组成，回流冷凝管、提取筒、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重，其它要干燥。

③试样处理：固体试样:称取充分混匀后的试样 2g~5g,准确至0.001g，全部移入滤纸筒内。

④抽提：将装好样的滤纸筒放入抽提筒。提取结束时可用滤纸检验，接取1滴抽提液，无油斑即表明提取完毕。

⑤称量：取下脂肪瓶，回收乙醚。待烧瓶内乙醚剩下1～2mL时，在水浴上蒸干，洗净外壁，,再于100℃±5℃干燥1h后，置于干燥器中冷却至室温，称量。继续干燥30min后冷却称量，重复以上操作直至恒重（至前后两次称量差不超过2mg）。

5、计算：

X=（W1-W0）/W×100

式中，X----样品中粗脂肪的质量分数,%;

W：样品的质量，g；

W1：抽提后脂肪和接收瓶的总重量,g；

W0：干燥的脂肪接收瓶的重量,g

6、注意事项：

①、抽提剂乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。

②、样品滤纸的高度不能超过虹吸管，否则上部脂肪不能提尽而造成误差。

③、样品和醚浸出物在烘箱中干燥时，时间不能过长，以防止极不饱和的脂肪酸受热氧化而增加质量。

④、脂肪烧瓶在烘箱中干燥时，瓶口侧放，以利空气流通。而且先不要关上烘箱门与 90°C以下鼓风干燥10—20min，驱尽残余溶剂后再将烘箱门关紧，升至所需温度。

⑤、乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。检查方法：取5mL 乙醚于试管中，加KI(100g/L)溶液 1mL，充分振摇 1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加 4 滴5 g/L淀粉指示剂显蓝色），则该乙醚需处理后使用。去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙醚。

⑥、反复加热可能会因脂类氧化而增重，质量增加时，以增重前的质量为恒重。